產品名稱：人食管鱗細胞

英文名稱：KYSE30

培養基：RPMI-1640*培養基：90%RPMI-1640+10%FBS

形態：上皮細胞樣，梭形，多角形，圓形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈

生長條件：培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣

生長特性：貼壁生長

儲存方式：液氮

傳代方法：

復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速沒入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內全部 溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml *培養基的離心管內，1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘，棄去 上清液，用 1-2mL *培養基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL *培養基的 T25 瓶中，放入培養箱培養。 細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 1-2mL 胰霉（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況， 在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續 消化），直接吸掉胰霉，加入 5-6 毫升*培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。④注意培養基 pH 值變化和細胞密度，定期換 液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

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