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走近腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒
更新時間:2017-09-21   點擊次數:952次

腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒簡介

腦源性神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是1982年Barde等首先在豬腦中發現的一種具有神經營養作用的蛋白質。腦源性神經營養因子及其受體在神經系統廣泛表達。一種小分子二聚體蛋白質BDNF結構、分布及信號轉導BDNF分子單體是由119個氨基酸殘基組成的分泌型成熟多肽,蛋白等電點為9.99,相對分子質量為3.5×103,主要由β折疊和無規則卷曲二級結構組成,含有3個二硫鍵,為一種堿性蛋白質。BDNF分布在中樞神經系統、周圍神經系統、內分泌系統、骨和軟骨組織等廣泛區域內,但主要是在中樞神經系統內表達,其中海馬和皮質的含量zui高。

腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒的顯色與比色

顯色

  顯色是ELISA試驗中zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。適當提高溫度,有助于加速顯色。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。在定量檢測中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。ELISA顯色結果通過酶標儀進行,可減少實驗誤差,提高臨界值樣本的分析準確度。盡量避免肉眼直接判斷結果,因為不同個體的視覺存在差異。應注意,加顯色劑時,要保持顯色劑不外流。加終止液時應避免產生較多氣泡,否則可能使假陽性結果的出現概率增加。

比色

  比色的方法有目視法和酶標比色法2種。目視法簡單明了,但對同一標本,操作者的不同有時會出現不同的結果,具有一定的主觀性。比色的結果通常用光密度表達,現按規定用吸光度表達。酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預熱儀器15~30min,使測得結果更為準確。比色前,應先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。在實際應用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對每個環節進行嚴格仔細的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應的出現,保證檢測結果真實可靠,為診斷和疾病防治提供可靠的理論依據。

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